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色譜柱老化,需要注意哪些細(xì)節(jié)?

點(diǎn)擊次數(shù):7096 更新時(shí)間:2020-09-01

01 那么有哪些情況需要對(duì)色譜柱進(jìn)行老化處理呢?

1、新購買的色譜柱:對(duì)新的色譜柱,在初次使用之前,通過老化處理,可以去除色譜柱內(nèi)鍵合不穩(wěn)定的固定液、或者填充柱中可能殘余的溶劑,保證新色譜柱性能的穩(wěn)定性。

 2、長時(shí)間放置未使用,又要重新開始使用的色譜柱:通過色譜柱的老化,可以去除由于長時(shí)間放置進(jìn)入色譜柱內(nèi)的污染物、氧氣和微量的水,恢復(fù)色譜柱的性能。

 3、長期使用的色譜柱或者進(jìn)行過復(fù)雜基質(zhì)和大量樣品分析的色譜柱:對(duì)于此種情況,通過老化主要除去色譜柱內(nèi)殘余的高沸點(diǎn)雜質(zhì)和污染物;另一方面,色譜柱長期高溫使用會(huì)造成固定液的流失,暴露部分活性位點(diǎn),通過老化處理,利用固定相熱脹冷縮的特點(diǎn),可以重新覆蓋色譜柱內(nèi)壁的活性位點(diǎn),恢復(fù)色譜柱性能。

 02 如何老化,以及老化過程中需要注意哪些細(xì)節(jié)呢?

 1、老化溫度的選擇

一般情況下,老化溫度控制在方法z高分析溫度和色譜柱恒溫溫度上限之間。

● 老化溫度也可設(shè)置成比色譜柱恒溫溫度上限低20-30℃;或者比方法z高分析溫度高20-30℃。

需要注意的是每根氣相柱都有它所能耐受的溫度限值,老化之前需要詳細(xì)閱讀色譜柱包裝盒或者說明書。老化過程中,一旦超過色譜柱溫度限值,就會(huì)導(dǎo)致固定相流失,縮短使用壽命。所以對(duì)老化溫度的要求就是在能保證去除雜質(zhì)和污染物的前提下,溫度越低越好。

 2、老化時(shí)間

具體的老化過程一般設(shè)置為程序升溫(緩慢升溫至設(shè)定的老化溫度),比如:初始溫度35℃,2-5℃/min,升溫至老化溫度,保持0.5-2h,具體老化時(shí)間可根據(jù)雜質(zhì)去除效果來定。

 3、防止氧氣進(jìn)入色譜柱

因?yàn)樵诟邷貤l件下,伴隨著氧氣的存在,固定液很容易被氧化,穩(wěn)定的硅烷鍵會(huì)發(fā)生斷裂,會(huì)造成很嚴(yán)重的柱流失以及柱效下降。

 所以為了避免氧氣進(jìn)入色譜柱,需要注意以下幾點(diǎn):

 ● 將色譜柱進(jìn)氣端與儀器進(jìn)樣口連接好,色譜柱末端置于酒精中,通載氣,觀察是否有連續(xù)氣泡。如果沒有,需檢查色譜柱是否發(fā)生中部斷裂、安裝是否牢固、系統(tǒng)是否漏氣。

 ● 將載氣流速設(shè)置成正常工作值,進(jìn)樣口、柱溫箱、檢測器(如果連接檢測器)設(shè)置為35℃或者關(guān)閉儀器溫度控制系統(tǒng),室溫條件下通載氣15-30min,置換掉儀器系統(tǒng)和色譜柱中可能存在的氧氣。

 ● 確保儀器其他接頭處正確安裝,并進(jìn)行檢漏。 

4、避免污染

一般情況下,為了避免對(duì)檢測器造成污染,不建議老化的過程中連接檢測器。常規(guī)的操作是使用實(shí)心壓環(huán)堵住檢測器下端,并關(guān)閉溫度。若連接檢測器,對(duì)于FID檢測器,不用點(diǎn)火,也不必開空氣和氫氣;如果是ECD檢測器,需要設(shè)定尾吹氣,避免過多的熱量和溫度傳遞給ECD,保證檢測器內(nèi)部放射源的安全。除此之外,禁止使用氫氣來老化色譜柱,避免由于氫氣泄露在柱溫箱內(nèi)部聚集,而引起爆炸。

 5、老化之前需進(jìn)行相關(guān)維護(hù)

對(duì)于長期使用的色譜柱或者進(jìn)行過復(fù)雜基質(zhì)和大量樣品分析的色譜柱,老化是為了去除殘留的部分污染物。這部分污染物一般屬于沸點(diǎn)較高的化合物,常常聚集在色譜柱的柱頭,比如樣品中的蛋白質(zhì)、色素、膠狀物等等。為了避免柱頭的污染物繼續(xù)向色譜柱內(nèi)部轉(zhuǎn)移,而又不能*從色譜柱內(nèi)部排出,在老化之前應(yīng)對(duì)色譜柱進(jìn)行切割,適當(dāng)截去一部分色譜柱。此外,還需對(duì)進(jìn)樣口襯管、石英棉、進(jìn)樣隔墊進(jìn)行維護(hù),避免在老化過程中對(duì)色譜柱造成二次污染。總的來說,去除污染源,再進(jìn)行色譜柱的老化才是有意義的。

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